注射劑中不溶性微粒（不可見異物）的整套解決方案

摘要：不溶性微粒（英文名：Sub-visible Particle/Particulate matter）與可見異物（Visible Particle）相對應(yīng)，意指不溶于水或有機溶劑，非代謝性的，肉眼所看不見的顆粒物。在一些注射劑應(yīng)用中，要盡可能避免不溶性微粒。對微粒的微觀大小的測量和分析，一直是應(yīng)用中的難題。本文試圖從粒徑分析（粒度分布）的技術(shù)測量手段入手，對注射劑的粒度評價手段做一些探討。

什么是不溶性微粒（不可見異物）

不溶性微粒（英文名：Sub-visible Particle/Particulate matter）與可見異物（Visible Particle）相對應(yīng)，意指不溶于水或有機溶劑，非代謝性的，肉眼所看不見的顆粒物。一般指的是粒徑＜50μm的微粒。

我們平時生活中常見的概念就是PM2.5 PM10，意指小于等于2.5μm和10μm的懸浮于空氣中的污染物。

圖一：可見異物VS 不可見異物范圍

圖一摘自美國藥典<US1788>章節(jié)，其指明了可見異物，不可見異物和重疊“灰色”區(qū)的粒徑范圍。

圖二：PSS儀器的檢測范圍和不同顆粒的粒徑大小

不溶性微粒（不可見異物）的來源

外源性：主要包括生產(chǎn)過程中各類包裝容器粘附的各種微粒，如塵埃，玻璃屑，有機物，無機鹽等；還包括生產(chǎn)設(shè)備磨損，相互摩擦撞擊造成的脫落微粒等。

內(nèi)源性：主要包括生產(chǎn)原料以及生產(chǎn)工藝的操作中所產(chǎn)生的不溶性微粒，如在使用注射劑等治療疾病的過程中，治療藥物間以及治療藥物與輸入藥液間的理化變化所產(chǎn)生的不溶性微粒。

注射劑中不溶性微粒（不可見異物）的危害

含有不溶性微粒的輸液進入人體可直接造成體溫升高，心跳加快，更甚可導(dǎo)致休克。這是由不溶性微粒在身體某部位疊加堆積造成。主要癥狀有：血管阻塞，刺激發(fā)炎，肉芽腫，血液凝結(jié)等。現(xiàn)今各國藥典均把注射劑中的不溶性微粒檢查作為必檢項目之一，隨著檢查要求越發(fā)嚴格，FDA近期望企業(yè)能檢測的下限下探至2μm。

不溶性微粒（不可見異物）藥典歷史

1977年 《中國藥典》規(guī)定使用目視燈檢法對注射液的澄明度檢查，此法無法檢測小粒子。

1985年 《中國藥典》規(guī)定注射液微粒限度，方法使用的是顯微計數(shù)法檢測不可見微粒

1995年-2000年 《中國藥典》在檢查方法上增加了光阻法為第二法

2005年 將原《澄明度檢査細則和判斷標(biāo)準(zhǔn)》修訂為“可見異物檢查法”并將光阻法變成了法

2015年 《中國藥典》2015年版為現(xiàn)行版本，基本與《美國藥典》中注射劑不溶性微粒檢測要求基本一致。

對于不溶性微粒（不可見異物）中國藥典和美國藥典的區(qū)別

雖然中國藥典和USP及其他藥典的檢測標(biāo)準(zhǔn)基本一致，但是也有一些細微差別。

表一：CP和USP在顆粒濃度規(guī)定一覽

美國藥典1788章節(jié)介紹

<USP1788>作為USP788的補充章節(jié)，對于檢測方法和儀器作了具體要求。具體項目為：

1） 體積確認（SAMPLE VOLUME ACCURACY）

2） 流速校準(zhǔn)(SAMPLE FOLOW RATE)

3） 校認(CALIBRATION)

4） 分辨率確認(SENSOR RESOLUTION)。

不溶性微粒（不可見異物）小知識

成人的毛細血管內(nèi)徑僅 4 ～ 7μm，嬰幼兒的毛細血管則更細。只有粒徑小于2μm的微粒才可能通過腎交換被排出體外，直徑超過毛細血管內(nèi)徑的微粒則無法排出。較大的微?？稍斐删植垦h(huán)障礙，粒徑為2～10 μm 的微粒則可能造成潛伏性的危害。

所以，FDA EXPECTATION如下圖：

不溶性微粒（不可見異物）的整套解決方案

AccuSizer 780 A2000作為美國PSS粒度儀AccuSizer系列的明星產(chǎn)品，其512個數(shù)據(jù)通道和32個自定義通道，不僅滿足了CP2015, USP787,USP788,USP789等現(xiàn)有各國藥典，其多通道的優(yōu)勢更符合未來發(fā)展的趨勢。其21CFR Part11法規(guī)軟件符合cGMP要求，含審計追蹤及電子簽名等功能，不僅可以直接給出各國藥典標(biāo)準(zhǔn)報告并且判斷是否符合標(biāo)準(zhǔn)，也可自定義報告模板，適應(yīng)不同的檢測需求。后加小容量檢測報告，大容量檢測報告。

圖五：PSS軟件出具的不溶性微粒檢測報告

PSS激光粒度儀介紹

AccuSizer780 A2000系列不溶性微粒檢測儀采用單顆粒光學(xué)傳感技術(shù)（Single Particle Optical Sizing）實現(xiàn)了對分散體系中的不溶性微粒量化計數(shù)。其對于微米級大小的顆粒的粒度表征在度以及性上有劃時代的意義。美國PSS粒度儀公司的SPOS技術(shù)更是結(jié)合了光阻效應(yīng)和光散理論，將顆粒計數(shù)的下限下探到0.15μm（150nm）。

這不僅迎合了更嚴苛的質(zhì)量要求，也助力于精密制造對環(huán)境雜質(zhì)的高標(biāo)要求。

傳統(tǒng)的光散射法如激光衍射法，動態(tài)光散射法在粒度表征中僅能統(tǒng)計出粒徑累積分布，也即D10，D50，D90等數(shù)值。其優(yōu)點在于無需校準(zhǔn)，易于檢測。但對少數(shù)粒子的靈敏性不足，具體表現(xiàn)為檢測不出少數(shù)粒子的存在，且其數(shù)據(jù)來源于數(shù)學(xué)算法，往往會成為假性數(shù)據(jù)峰。SPOS技術(shù)原理圖：

圖六：PSS的SPOS技術(shù)原理及AccuSizer儀器圖

技術(shù)優(yōu)勢：

1. 檢測范圍廣，0.15-5000μm；

2. 512數(shù)據(jù)通道；

3. 32自定義通道；

4. 超高分辨率；

5. 微量進樣（選配）；

6. 自動進樣（選配）；

7. 兼容水相和有機相；

8. 模塊化設(shè)計，便于產(chǎn)品升級；

9. 傳感器現(xiàn)場校準(zhǔn)，不需要返；。

內(nèi)置ISO,USP等系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)，且可自定義標(biāo)準(zhǔn)。